Klasiskais cūku drudža vīrusa antiviela ELISA KIT

Specifikācija

 

 

Testa procedūras un interpretācija

 

1. solis testa procedūra

1.1 Mazgāšanas šķīduma sagatavošana

WOrking koncentrācija washing šķidrums:Pirms lietošanas mazgāšanas šķīdums ir jāatjauno līdz istabas temperatūrai (20-25 grāds) un vienmērīgi jātrako, lai tas būtu vienāds. Pēc tam 20 reizes atšķaidiet koncentrēto mazgāšanas šķīdumu ar attīrītu ūdeni (piemēram, 5 ml koncentrētu mazgāšanas šķīdumu pievieno 95 ml attīrītam ūdenim), labi samaisiet, un atšķaidītu mazgāšanas šķidrumu var uzglabāt 2-8 grādu 7 dienas.

1.2 Parauga sagatavošana

① Tika ņemtas veselas dzīvnieku asinis, 10 minūtes centrifugētas ar 4000 apgriezieniem minūtē un supernatants tika savākts. Serumu var arī koagulēt dabiski bez hemolīzes.

② Atšķaidiet serumu, kas jāpārbauda 10 reizes seruma atšķaidīšanas plāksnē (piemēram: pievienojiet 15UL seruma pārbaudi līdz 135Ul parauga atšķaidītājam).

Piezīme: negatīva un pozitīva kontrole nav jāatšķaida.

1.3 Testa procedūra

①Take Fermenta etiķetes mikroplate (saskaņā ar paraugu skaitu var izjaukt un izmantot vairākas reizes), pievienojiet fermentu etiķetes mikroplate 100UL atšķaidītā seruma, iestatiet divas iedobes negatīvai kontrolei un pozitīvai kontrolei un pievienojiet 100Ul tam 100Ul. attiecīgi labi reakcija. Viegli sakratiet paraugu urbumā, izmantojot plāksnes plēvi, lai pārklātu plāksni, un inkubējiet 37 grādos 30 minūtes.

② Atveriet blīvējuma plāksnes plēvi, labi sakratiet šķīdumu plāksnē, katrai iedobei pievienojiet 300 µl strādājošās koncentrācijas mazgāšanas šķidruma un pēc tam izmetiet šķidrumu akā. Atkārtojiet iepriekš minētās darbības 5 reizes un visbeidzot nosusiniet uz tīra absorbējoša papīra.

③Add 100 µl enzīma konjugāts ar katru iedobi, pārklāj plāksni un inkubē 37 grādos 30 minūtes.

④ Atveriet blīvējuma plāksnes plēvi, labi sakratiet šķīdumu plāksnē, katrai iedobei pievienojiet 300 µl strādājošās koncentrācijas mazgāšanas šķidruma un pēc tam izmetiet šķidrumu akā. Atkārtojiet iepriekš minētās darbības 5 reizes un visbeidzot nosusiniet uz tīra absorbējoša papīra.

⑤Add 100µL substrāta šķīdums katrai iedobei, pārklāj plāksni un inkubē 10 minūtes 37 grādu attālumā no gaismas.

⑥Add 50 µl apturēšanas šķīdums katrai iedobei un nosakiet rezultātu 5 minūšu laikā.

 

2. solis Rezultāta interpretācija

Katras urbuma OD450 vērtība tika nolasīta uz 96- akas mikroplašu lasītāja.

2.1 validācija

Vidējā OD45 0 negatīvās kontroles vērtība bija <0. 2 un pozitīvās kontroles vidējā OD450NM vērtība bija lielāka vai vienāda ar 0,7, eksperimentālie rezultāti bija derīgi. Pretējā gadījumā pārbaude jāatkārto.

2.2 Aprēķina metode

Katram paraugam aprēķiniet S/ P, izmantojot koriģēto paraugu un vadības vērtības:

2.3 Rezultātu interpretācija

Kad s/p <0. 2, tas tiek vērtēts kā negatīvs.

Kad s/p> 0. 3, tas tiek vērtēts kā pozitīvs.

Kad {{0}}.

 

Populāri tagi: Klasiskā cūku drudža vīrusa antiviela ELISA KIT, Ķīnas klasiskā cūku drudža vīrusa antivielu ELISA komplekta piegādātāji, ražotāji, rūpnīca