Anti-GE cūku pseidorabies vīrusa antivielu ELISA komplekts

Specifikācija

PRV-GE AB ELISA

Paredzētā lietošana: Cūku pseidorabies vīrusa ge bloķēšana

Antivielu ELISA noteikšanas komplekts ir paredzēts GE antivielu noteikšanai cūku cūku pseidorabiju vīrusa serumā in vitro. Pārbaude tiek izmantota, lai atšķirtu inficēto savvaļu

vīruss un vakcinēts no imunizācijas ar GE gēna dzēšanas vakcīnu.

Paraugs: serums

Nepieciešamie materiāli, bet nav nodrošināti:

Attīrīts ūdens

Pipettors

96- labi mikroplašu lasītājs (450nm)

Taimeris

Centrifūga (4000 apgriezieni)

Veļas mašīna

Krāsns (37 grādi)

 

Testa procedūras un interpretācija

1. solis testa procedūra

1.1 Mazgāšanas šķīduma sagatavošana

WOrking koncentrācija washing šķidrums:Pirms lietošanas mazgāšanas šķīdums ir jāatjauno līdz istabas temperatūrai (20-25 grāds) un vienmērīgi jātrako, lai tas būtu vienāds. Pēc tam 20 reizes atšķaidiet koncentrēto mazgāšanas šķīdumu ar attīrītu ūdeni (piemēram, 5 ml koncentrētu mazgāšanas šķīdumu pievieno 95 ml attīrītam ūdenim), labi samaisiet, un atšķaidītu mazgāšanas šķidrumu var uzglabāt 2-8 grādu 7 dienas.

1.2 Parauga sagatavošana

① Tika ņemtas veselas dzīvnieku asinis, 10 minūtes centrifugētas ar 4000 apgriezieniem minūtē un supernatants tika savākts. Serumu var arī koagulēt dabiski bez hemolīzes.

② Atšķaidiet seruma paraugu 1: 1 (pievienojiet 70UL seruma paraugu 70UL parauga atšķaidītājam) un rūpīgi samaisiet.

Piezīme: negatīva un pozitīva kontrole nav jāatšķaida.

1.3 Testa procedūra

①Take Fermentu etiķetes mikroplate (saskaņā ar paraugu skaitu var izjaukt un izmantot vairākas reizes), pievienojiet fermentu marķējuma mikroplatam 100UL atšķaidītā seruma, un katram pievienojiet negatīvam katram divām iedobēm, un katram pievienojiet 100UL negatīvam un pozitīvas reakcijas kontroles attiecīgi. Viegli sakratiet paraugu urbumā, izmantojot plāksnes plēvi, lai pārklātu plāksni, un 60 minūtes inkubē 37 grādos.

② Atveriet blīvējuma plāksnes plēvi, sakratiet šķīdumu plāksnē aku, pievienojiet 300 µl strādājošas koncentrācijas mazgāšanas šķidruma katrai iedobei un pēc tam izmetiet šķidrumu akā. Atkārtojiet iepriekš minētās darbības 5 reizes un visbeidzot nosusiniet uz tīra absorbējoša papīra.

③Add 100 µl enzīma konjugāts ar katru iedobi, pārklāj plāksni un inkubē 37 grādos 30 minūtes.

④ Atveriet blīvējuma plāksnes plēvi, sakratiet šķīdumu plāksnē aku, pievienojiet 300 µl strādājošas koncentrācijas mazgāšanas šķidruma katrai iedobei un pēc tam izmetiet šķidrumu akā. Atkārtojiet iepriekš minētās darbības 5 reizes un visbeidzot nosusiniet uz tīra absorbējoša papīra.

⑤Add 100µL substrāta šķīdums katrai iedobei, pārklāj plāksni un inkubē 15 minūtes 37 grādu attālumā no gaismas.

⑥Add 50 µl apturēšanas šķīdums katrai iedobei un nosakiet rezultātu 5 minūšu laikā.

2. solis Rezultāta interpretācija

Katras urbuma OD450 vērtība tika nolasīta uz 96- akas mikroplašu lasītāja.

2.1 validācija

The average OD450nm value of negative control was ≥ 0.5 and the blocking rate of positive control was >50%, eksperimentālie rezultāti bija derīgi. Pretējā gadījumā pārbaude jāatkārto.

2.2 Aprēķina metode

Katram paraugam aprēķiniet PI (bloķēšana ATE) šādi, izmantojot koriģēto paraugu un vadības vērtības:

2.3 Rezultātu interpretācija

Kad pi <40%, to vērtē kā negatīvu.

Kad PI> 50%, to vērtē kā pozitīvu.

Kad par 40% mazāk vai vienāds ar PI, kas ir mazāks vai vienāds ar 50%, tas tiek uzskatīts par aizdomīgu un iesaka atkārtot paraugu ņemšanu un pārbaudīt nedēļu vēlāk.

Populāri tagi: anti-GE cūku pseidorabies vīrusa antivielu ELISA KIT, Ķīna anti-GE cūku pseidorabies vīrusa antivielu ELISA komplekta piegādātāji, ražotāji, rūpnīca