Pēdu un mutes slimības vīrusa-O antivielu ELISA komplekts

Specifikācija

FMDV-O AB ELISA

Paredzētā lietošana: Liellopu pēdu un mutes slimības vīruss-O

Antivielu ELISA noteikšanas komplekts ir paredzēts pēdu un mutes antivielu noteikšanai liellopu serumā in vitro. Pārbaude tiek izmantota, lai novērtētu pēdu un mutes slimības vīrusa O tipa antivielu imunitātes stāvokli saimniecību stāvoklī.

Paraugs: serums

Nepieciešamie materiāli, bet nav nodrošināti:

Attīrīts ūdens

Pipettors

96- labi mikroplašu lasītājs (450nm)

Taimeris

Centrifūga (4000 apgriezieni)

Veļas mašīna

Krāsns (37 grādi)

Testa procedūras un interpretācija

1. solis testa procedūra

1.1 Mazgāšanas šķīduma sagatavošana

WOrking koncentrācija washing šķidrums:Pirms lietošanas mazgāšanas šķīdums ir jāatjauno līdz istabas temperatūrai (20-25 grāds) un vienmērīgi jātrako, lai tas būtu vienāds. Pēc tam 20 reizes atšķaidiet koncentrēto mazgāšanas šķīdumu ar attīrītu ūdeni (piemēram, 5 ml koncentrētu mazgāšanas šķīdumu pievieno 95 ml attīrītam ūdenim), labi samaisiet, un atšķaidītu mazgāšanas šķidrumu var uzglabāt 2-8 grādu 7 dienas.

1.2 Parauga sagatavošana

① Tika ņemtas veselas dzīvnieku asinis, 10 minūtes centrifugētas ar 4000 apgriezieniem minūtē un supernatants tika savākts. Serumu var arī koagulēt dabiski bez hemolīzes.

② Atšķaidiet seruma paraugu 1:25 (pievienojiet 5UL seruma paraugu 120UL parauga atšķaidītājam) un rūpīgi samaisiet.

Piezīme: arī negatīvai un pozitīvai kontrolei nepieciešama atšķaidīšana.

1.3. Fermentu konjugāta sagatavošana

Atšķaidiet fermenta konjugātu 1:90 (pievienojiet 5UL enzīmu konjugātu (x100) 445UL parauga atšķaidītājam) un rūpīgi samaisiet.

1.4 Testa procedūra

①Take Fermentu etiķetes mikroplate (saskaņā ar paraugu skaitu var izjaukt un izmantot vairākas reizes), pievienojiet fermentu marķējuma mikroplatam 100UL atšķaidītā seruma, un katram pievienojiet negatīvam katram divām iedobēm, un katram pievienojiet 100UL negatīvam un pozitīvas reakcijas kontroles attiecīgi. Viegli sakratiet paraugu urbumā, izmantojot plāksnes plēvi, lai pārklātu plāksni, un inkubējiet 37 grādos 30 minūtes.

② Atveriet blīvējuma plāksnes plēvi, sakratiet šķīdumu plāksnē aku, pievienojiet 300 µl strādājošas koncentrācijas mazgāšanas šķidruma katrai iedobei un pēc tam izmetiet šķidrumu akā. Atkārtojiet iepriekš minētās darbības 5 reizes un visbeidzot nosusiniet uz tīra absorbējoša papīra.

③Add 100 µl enzīma konjugāts ar katru iedobi, pārklāj plāksni un 45 minūtes inkubē 37 grādos.

④ Atveriet blīvējuma plāksnes plēvi, sakratiet šķīdumu plāksnē aku, pievienojiet 300 µl strādājošas koncentrācijas mazgāšanas šķidruma katrai iedobei un pēc tam izmetiet šķidrumu akā. Atkārtojiet iepriekš minētās darbības 5 reizes un visbeidzot nosusiniet uz tīra absorbējoša papīra.

⑤Add 100µL substrāta šķīdums katrai iedobei, pārklāj plāksni un inkubē 10 minūtes 37 grādu attālumā no gaismas.

⑥Add 50 µl apturēšanas šķīdums katrai iedobei un nosakiet rezultātu 5 minūšu laikā.

2. solis Rezultāta interpretācija

Katras urbuma OD450 vērtība tika nolasīta uz 96- akas mikroplašu lasītāja.

2.1 validācija

Negatīvās kontroles vidējā OD450NM vērtība bija<0.15 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Aprēķina metode

Katram paraugam aprēķiniet S/P, izmantojot koriģēto paraugu un vadības vērtības:

2.3 Rezultātu interpretācija

Kad S/P<0.15, it is judged as negative.

Kad s/p ir lielāks vai vienāds ar 0. 25, tas tiek vērtēts kā pozitīvs.

Kad 0. 15 mazāk vai vienāds ar S/P<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Populāri tagi: Pēdu un mutes slimības vīruss-O antiviela ELISA KIT, Ķīnas pēdu un mutes slimības vīrusa-O antivielu ELISA komplekta piegādātāji, ražotāji, rūpnīca